磁珠作為化學(xué)發(fā)光試劑的關(guān)鍵原料,直接影響化學(xué)發(fā)光試劑的產(chǎn)品質(zhì)量,考察磁珠性能一般通過(guò)非特異吸附、粒徑及均勻程度、不同類型及不同濃度的選擇幾種常用方向作為切入點(diǎn)?;瘜W(xué)發(fā)光試劑常用的磁珠一般粒徑在1μm-10μm之間,大多數(shù)IVD廠商都是通過(guò)顯微鏡或者納米粒度儀來(lái)檢測(cè)磁珠的粒徑,然而顯微鏡需要測(cè)試干燥狀態(tài)下的樣品,無(wú)法對(duì)顆粒在溶液中的真實(shí)狀態(tài)進(jìn)行表征分析,且視野內(nèi)數(shù)量有限,很難對(duì)異常情況做出的分析,非??简?yàn)研發(fā)人員的經(jīng)驗(yàn),另外好的顯微鏡法儀器價(jià)格不菲。納米粒度儀雖然可以對(duì)磁珠粒徑很好的檢測(cè),但是密度較大,粒徑1μm或以上的磁性微球由于在溶液中沉降速率過(guò)快,影響布朗運(yùn)動(dòng),因此測(cè)試可能存在一定偏差。
故而如何獲得真實(shí)的磁珠粒徑,尤其是當(dāng)科研人員想要分析顆粒在特定溶液是否聚集,觀察不同緩沖體系或者制備過(guò)程中磁珠粒徑的變化,便尤為艱難?;谝陨侠Ь常瑠W博士為大家?guī)?lái)了美國(guó)PSS粒度儀公司的AccuSizer A7000 SIS儀器,通過(guò)的單顆粒光學(xué)傳感技術(shù)(SPOS),解決了磁珠的粒徑檢測(cè)問(wèn)題,還可以進(jìn)一步定量顆粒數(shù)量信息。
接下來(lái)我們來(lái)看一下SPOS技術(shù)的儀器AccuSizer A7000 SIS為何適合磁珠粒徑的檢測(cè)
1.檢測(cè)結(jié)果與顯微鏡下的結(jié)果可直接對(duì)應(yīng):
選取Dynabeads™的1μm和2.8μm磁珠,通過(guò)AccuSizer A7000 SIS檢測(cè),并于顯微鏡的結(jié)果進(jìn)行對(duì)照。
表一 Dynal 1μm 羧基
AccuSizer A7000 SIS 譜圖 | 顯微鏡 |
表二 Dynal 2.8μm 羧基
AccuSizer A7000 SIS 譜圖 | 顯微鏡 |
2.定量磁珠顆粒數(shù)量信息:
AccuSizer A7000 SIS在檢測(cè)出粒徑分布的同時(shí),還可以給出不同粒徑之間顆粒數(shù)量,累計(jì)數(shù)量,數(shù)量占比甚至體積占比等等信息。
圖三 AccuSizer A7000 SIS 全通道數(shù)據(jù)(局部)
3.儀器重現(xiàn)性優(yōu)良:
通過(guò)配置不同濃度的樣品,將結(jié)果疊加,可以看到不同濃度的樣品,主峰粒徑以及緩沖體系中游離的雜質(zhì)不僅能的檢測(cè)出來(lái),并且數(shù)量分布走勢(shì)一致。
圖四 配置不同濃度樣品的檢測(cè)結(jié)果
了解了AccuSizer A7000 SIS的優(yōu)點(diǎn),科研人員到底應(yīng)該如何使用,下面我們通過(guò)幾個(gè)簡(jiǎn)單的對(duì)比,來(lái)進(jìn)行初步的了解。
1.包被前后粒徑的差異
圖五 Dyanl 2.8μm 羧基 包被后(紅)
2.過(guò)期前后粒徑的差異
圖六 國(guó)內(nèi)某品牌過(guò)期前(紅)與過(guò)期后(藍(lán))
3.國(guó)內(nèi)外廠家粒徑的差異
表三 配置不同濃度樣品的檢測(cè)結(jié)果
國(guó)外A廠粒徑分布 | 國(guó)內(nèi)某廠粒徑分布 |
磁珠的粒度檢測(cè)會(huì)受到很多因素的影響,從而對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響。AccuSizer 780 A7000 SIS能輕松檢測(cè)其粒度,檢測(cè)結(jié)果不僅給出粒度分布,也可以量化不同粒子的數(shù)量。結(jié)果可靠及。